關(guān)于ATCC細(xì)胞復(fù)蘇程序

ATCC是美國(guó)細(xì)胞庫(kù)，擁有超過(guò)30,000種細(xì)胞株，是生命科學(xué)研究的重要資源。ATCC常用細(xì)胞株鑒定是指對(duì)ATCC細(xì)胞株進(jìn)行鑒定，以確保其純度、認(rèn)證和可重復(fù)性。

ATCC常用細(xì)胞株鑒定的目的是為了保證ATCC細(xì)胞株的質(zhì)量和可靠性。ATCC細(xì)胞株鑒定包括細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生長(zhǎng)特性、細(xì)胞表型、基因型等方面的檢測(cè)。這些檢測(cè)可以幫助研究人員確定細(xì)胞株的身份、純度和穩(wěn)定性，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。

ATCC細(xì)胞復(fù)蘇程序：

1、準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)容器(如T-75細(xì)瓶)，加入至少10ml適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，并平衡溫度及pH。

2、從液氮罐中取出凍存管，并在37℃(或適合該細(xì)胞的溫度)水浴中緩慢搖動(dòng)至冰晶融化(約2min)，注意解凍過(guò)程要迅速。

3、從水浴中取出凍存管，浸泡或者噴撒酒精消毒、后續(xù)的操作，需在無(wú)菌操作臺(tái)中，并保證嚴(yán)格無(wú)菌。

4、擰開(kāi)凍存管蓋，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有9ml培養(yǎng)基的無(wú)菌離心管中。溫和離心(125g×10min)，棄去上清去除凍存保護(hù)劑。注意不要擾動(dòng)細(xì)胞層。加入1-2ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，緩慢吹打使細(xì)胞團(tuán)變松散。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)基的容器中充分混合，

5、24小時(shí)后，檢測(cè)細(xì)胞狀態(tài)。

注:細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，應(yīng)迅速融化凍存的細(xì)胞溶液，然后迅速與培養(yǎng)基混合，并接種到合適的細(xì)胞瓶中。

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